供应产品分类

基本资料

赛百慷(上海)生物技术股份有限公司(iCellBioscience,Inc.)是一家专注于高品质原代细胞、细胞株/系、iPS细胞产品的研发和生产,并提供专业的技术外包服务的高新生物技术企业,总部位于上海。赛百慷( ... [详细介绍]

公司新闻 »更多

联系方式

公司地址

上海市徐汇区聚科生物园银都路466号3号楼2层
邮编:200000

联系电话

021-****5516登录查看商家电话

电子邮箱

524078496@****om登录查看商家邮箱

公司网址

在线联系: 点击这里给我发消息

公司新闻»更多

客户细胞培养过程中常见的问题说明【赛百慷】

发布时间:2017-08-28 16:03 点击次数:

       通过多次与客户的了解和反馈,赛百慷的售后服务人员发现,客户在收到经过专业包装的细胞后,由于没有经过系统专业的检查和处理,就直接进行实验,以致于后期容易产生了一系列问题。鉴于客户对这一方面的知识有所欠缺薄弱,赛百慷的技术人员经过总结,对于在收到细胞怎样专业处理做了以下说明:
       一、问:细胞收到之后怎么处理?
       答:常温运输的细胞

       首先观察包装是否完好,瓶口是否漏液,然后显微镜先拍摄4x 、10x、 40x不同倍数下的照片各两张。放入培养箱稳定两小时后开始换液,贴壁细胞把培养基全部吸去,加入6ml新的完全培养基,悬浮细胞离心后,用6ml完全培养基重悬细胞。注意细胞的培养环境。
        低温运输的细胞,通常是用干冰寄送。

       客户收到细胞后,观察干冰是否挥发,细胞是否溶解。没有问题可以直接放入液氮罐保存(长时间),或者超低温冰箱(不超过一周)。
        二、问:细胞冻存后,复苏效果不好?
        答:目前还有很多人采取4°、﹣20°各半小时再转入-80°冰箱,这方法不好控制,有的细胞适合,有的细胞就达不到理想效果。现可采用程序降温盒来冻存,降温盒内添加的异丙醇可以达到每分钟降一度的要求,操作也简单。
       冻存液采用90%血清+10%DMSO。部分低分化或干细胞可以添加马血清冻存,另外可以先将冻存液配置成80%血清+20%DMSO,重悬细胞时用血清重悬,避免直接用DMSO对细胞吹打造成损伤。
       三、问:细胞有黑点怎么回事?
       答:这种情况可能性就比较多了,首先判断黑点是在细胞表面,还是胞质内,还是在细胞外。细胞表面黑点增多可能是因为状态变差,可能是培养条件不适合导致,或者细胞活性降低。细胞质内黑点增多,先确认是否是多核细胞。细胞外有黑点,黑点游动则可能是细菌污染,不游动但随着培养时间增长黑点数量增多,应该检测是不是支原体污染,悬浮细胞多数有黑点,可能是碎片,可低速离心去除。腺癌多数是分泌因子,看着黑点增多。
       四、培养基,血清怎么选?
       答:最好和细胞来源用的什么品牌使用相同的血清。基础培养基进口和国产差别不大。专业的细胞公司使用的血清都是经过了大量细胞培养验证的,不要轻易更换,目前国内血清品牌较多,质量不齐。